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盤錦恒生塑材改性制品有限公司坐落在遼寧省盤錦精細化工產業(yè)開發(fā)區(qū),總占地面積21000平方米,年生產能力在 3 萬噸,是遼寧省生產制造全系列塑料制品的高科技研發(fā)型企業(yè)。
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  • 塑料包埋不脫鈣大塊骨組織切片及染色
  • 發(fā)布時間:2016-02-01 瀏覽次數:49
  •   ◎邁新技術交流塑料包埋不脫鈣大塊骨組織切片及染色呂榮徐新智王軍2500型切片機,制作塑料包埋不脫鈣大塊骨組織切片,獲得8~ 10Pm厚完整切片。游離片染色,著色效果良好。

      1材料與方法1.1取材部位狗撓骨,大小35mmX 20%中性福爾馬林液內固定1~2d流水沖洗1~2h1.2包埋劑的制備1號試劑:甲基丙稀酸甲脂400ml鄰苯二甲酸二丁酯100ml二甲苯500ml2號試劑:甲基丙稀酸甲酯800ml,鄰苯二甲酸二丁酯200ml 3號試劑:甲基丙稀酸甲酯800ml過氧化苯甲酰20g鄰苯二甲二丁酯200mL4號試劑:甲基丙稀酸甲酯800ml過氧化苯甲酰60g鄰苯二甲酸二丁酯200ml.(過氧化苯甲酰需在37°C烘箱內干燥24h后方可使用,3號、4號試劑配制完畢后儲存于4C冰箱中)1.3脫水與包埋1.3.1骨組織浸入70%,80%,90%,正丁醇,無水乙醇1 11,二甲苯111,各2h 1.3.2浸入1號,2號,3號包埋劑內各2~ 1.3.3將干燥后的樣品置于小玻璃瓶中(小玻璃瓶容量大小一般為樣本的3~5倍)1.3.4用鉛筆書寫標簽紙,并用透明膠帶粘于玻璃瓶體上。

      1.3.5將玻璃瓶放入抽真空泵內(一0.64個大氣壓)抽1~ 1.3.6小玻璃瓶加蓋,并穿入7號針頭2個(排氣),在放入抽真空泵繼續(xù)抽1h放入37C烘箱內1d完全凝固后,將玻璃瓶置于一30 C冰箱15min取出用布包瓶,敲碎玻璃瓶,取出包埋塊,并即時標記。

      1.4切片的制作對包埋塊適當修整,使其能固定于切片機上。切片厚度10Pm1.5游離片染色1.5.1切片的準備切片浸入0. 1%甲酸10min自來水10次/min:20010328修改日期:2001 0725作者單位:第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院全軍骨科研究所,西安710032 1.5.2染液的制備A液:固綠FCF 3.75g蒸餾水500mW水醋酸6mlB液:天青1 1.5g蒸餾水250ml.C液:堿性品紅5g將A、B、C液混合,攪拌,溶解后過濾,60C干燥,制成骨染色粉。使用前用70%乙醇100ml加骨染色粉0. 1.5.3骨粉染色液內10min蒸餾水洗3次,無水乙醇3次/2min中性樹膠封固2結果3體會3.1影響因素(1)溫度:高溫可引起爆聚,包埋塊變脆。(2)必須充分抽真空,如抽真空不徹底,組織塊內殘留大量氣泡,影響切片質量,甚至造成切片完全失敗。(3)漂片水溫過高塑料易溶解,水溫過低塑料及組織不宜展平。(4)染色時間的長短決定染色的深淺。(5)過氧化苯酰的量應根據溫度高低而定,一般為20 3.2缺點(1)周期長,從固定、脫水、浸塑、切片約需2周。(2)包埋液在聚合時易產生氣泡。(3)切片不易攤平。(4)由于脫片不宜做組化和雜交方面的染色,只實用于做游離染色。

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